高效液相色譜串聯質譜法檢測駱駝乳中乳鐵蛋白
乳鐵蛋白是一種可以結合鐵的糖蛋白，1939 年首次在牛乳中發(fā)現，1960 年由Johannson 從人乳中存在分離培養(yǎng)出來，據血清轉鐵蛋白，轉科屬在一起，卵轉鐵蛋白黑色素轉鐵蛋白，乳鐵蛋白的分子量大小約為80kDa ，由一條折疊成一個兩個球狀裂片的多肽鏈可以組成，能夠通過結合企業(yè)兩個鐵原子。
建立了超高效液相色譜串聯質譜法，并基于特征肽驗證了駱駝乳中乳鐵蛋白的測定方法，駱駝的乳鐵蛋白通過肝素親和層析純化，然后用于篩選胰蛋白酶肽標簽。在序列信息數據庫可以搜索的基礎上我們選擇一個特征肽，并通過超高效液相色譜和四極桿飛行活動時間串聯質譜分析法從純化的駱駝科鐵蛋白的胰蛋白酶水解反應產物中進行分析鑒定，包括將翼同位素標記肽，脂質，和酪蛋白處理過的前處理工序，然后用胰蛋白酶消化，分析物在Acquity UPLC BEH 300 C18柱上分離，然后通過在三重四極質譜儀上在7分鐘內檢測。試驗和定量限值分別為3.8毫克公斤-1和11毫克公斤-1。回收率為74.5％-103.6％和低于7.7％的相對標準偏差應用該方法進行測定了新疆10個樣品中乳鐵蛋白的含量。
駱駝奶中提取的駱駝乳鐵蛋白的SDS-PAGE；Lane 1，分子量標準；Lane 2，牛乳乳鐵蛋白；Lane 3，純化駱駝乳鐵蛋白。
